顯微鏡測微尺測定細胞大小的原理和步驟:
使用顯微鏡測微尺測定微生物細胞大小的原理
微生物細胞的大小是微生物分類鑒定的重要依據(jù)之一。微生物個體微小,必
須借助于顯微鏡才能觀察,要測量微生物細胞大小,也必須借助于特殊的測微計在顯微鏡下進行測量。
顯微測微計由鏡臺測微尺(stage micrometer)和目鏡測微尺(ocular micrometer)兩部分組成。
鏡臺測微尺是一塊中央有刻玻片(圖 2-7),刻度的總長爲 l mm,等分爲100 小格,每小格長 10 μm,
于對目鏡測微計進行標定的。目鏡測微尺可直接用于測量細胞大小,它是一塊圓形玻片(圖 2-8),其中央有等分到度,測
量時將其放在接目鏡中的隔板上。目鏡測微尺刻度的總長爲 l cm,等分爲 100 小格,每小格長 100 μm,
由于目鏡測微尺所測量的是微生物細胞經(jīng)過顯微鏡放大之后所成像的大小,刻度實際代表的長度隨使用的目鏡和物鏡放大倍數(shù)及鏡筒的
長度而改變,所以,使用前須先用鏡臺測微計進行標定,求出某一放大率下,目鏡測微尺每一小格所代表的長度,然后用目鏡測微計直接測被測物件的大小。
一個目鏡測微尺刻度校正因子(calibration factor)的計算:一個目鏡測微尺刻度
(μ = 鏡臺測微尺上二重迭線間已知的距離 / 該二重迭線m)間目鏡測微尺的刻度
例 1: 假如二重迭線間已知的距離為 2 個鏡臺測微尺刻度(2 X 10 μ
m),對應 13個目鏡測微尺刻度,則
每一目鏡測微尺刻度的校正因子 = 20 μm / 13 = 1.54 μm
例 2: 假如以顯微鏡目鏡測微尺觀察某一微生物,長度為 5 個目鏡測微尺刻度,則
微生物長度 = 目鏡測微尺測量的刻度數(shù) X 每一目鏡測微尺刻度的校正因子
= 5 X 1.54 μm = 7.70 μm